ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)操作技巧您知多少？

　　ELISA試劑盒在國內(nèi)有許多種叫法，例如：ELISA檢測(cè)試劑盒、ELISA Kit、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等，比較常見的叫法是ELISA檢測(cè)試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒等；ELISA試劑盒適用于體外定性檢測(cè)人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎（HEV）病毒IgM抗體ELISA檢測(cè)，自從60-70年代問世以來，得到科研工作者的認(rèn)可及推崇，在歐美及中國獲得很大的推廣，尤其是國內(nèi)生化領(lǐng)域的長(zhǎng)足發(fā)展。Elisa生物試驗(yàn)是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡(jiǎn)便，結(jié)果判斷較客觀等因素，已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。為了保證ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)質(zhì)量，我們需要掌握一些小技巧以助于實(shí)驗(yàn)的成功，那么ELISA試劑盒的操作技巧您知道嗎？

　　ELISA試劑盒的17種操作技巧，如若您掌握了這些實(shí)驗(yàn)技巧之后，在做ELISA實(shí)驗(yàn)中，試驗(yàn)起來會(huì)更熟練，大大的降低了實(shí)驗(yàn)過程中的風(fēng)險(xiǎn)，ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的入門新手掌握了這些知識(shí)后，操作起來都會(huì)快的多。

　　ELISA試劑盒17個(gè)相關(guān)操作技巧如下：

　　1.切記在加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。

　　2.合理安排檢測(cè)量，以免反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。

　　3.在吸取液體時(shí)，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。

　　4.務(wù)必做雙孔實(shí)驗(yàn)，這樣才既能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性，又能反映出試劑盒的精密度。

　　5.樣品稀釋液應(yīng)用加液器加注，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性。

　　6.為防止樣品蒸發(fā)，試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜。

　　7.未使用完的酶標(biāo)板或者試劑，請(qǐng)于2-8℃保存。辣根過氧化物酶標(biāo)記抗人IgG工作液請(qǐng)依據(jù)所需的量配置使用。請(qǐng)勿重復(fù)使用已稀釋過的辣根過氧化物酶標(biāo)記抗人IgG工作液。

　　8.ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中，加樣后及時(shí)放人孵箱，標(biāo)本較多時(shí)，要分批操作。按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間，防止孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗。

　　9.剩余樣品及廢棄物應(yīng)經(jīng)121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘，或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄。

　　10.人ELISA試劑盒洗滌時(shí)各孔均需加滿液體，防止孔口有游離酶不能洗凈。

　　11.每次實(shí)驗(yàn)留一孔作為空白調(diào)零孔，該孔不加任何試劑，只是最后加底物溶液及2N H2SO4。測(cè)量時(shí)先用此孔調(diào)OD值至零。

　　12.手工洗板時(shí)每次加入洗滌液后。應(yīng)靜置15～30s，不要將一個(gè)酶標(biāo)孑L中的洗滌液濺入另一酶標(biāo)孔中，防止交叉污染。甩去洗滌液后將酶標(biāo)板放在毛巾或吸水紙上拍干。

　　13.對(duì)樣本的結(jié)果有疑問時(shí)需要使用其他檢測(cè)方法進(jìn)行驗(yàn)證。

　　14.沒有去離子水或雙蒸水時(shí)，可以使用娃哈哈純凈水配制溶液，切勿使用自來水。

　　15.在使用微量加樣器時(shí)，吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭，即使吸取標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

　　16.吸取液體時(shí)速度不易太快，以免產(chǎn)生氣泡，人ELISA試劑盒吸取的量不夠準(zhǔn)確。

　　17.吸取液體時(shí)要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸，減少誤差。